アミノ無塩基ビルディングブロックでsiRNAの活性・オフターゲット・安定性を調整
- ピロリジンおよびアミノシクロペンタン骨格をもつ4種の無塩基ホスホロアミダイトを合成し、siRNA鎖のさまざまな位置に導入した。
- センス鎖への導入で二本鎖の安定性が低下しサイレンシングが向上した。あるアミノシクロペンタン異性体が最も強力で、シード領域に導入した立体異性体はmiRNA様オフターゲット作用を抑えた。
- マウスでは高活性体が肝臓でのノックダウンを改善し、シード修飾体はオフターゲット転写産物を減らした。3′末端への導入はヌクレアーゼ耐性を高め、コンジュゲーション用リンカーとしても機能した。
💡 ポイント アブストラクトに基づく見解
無塩基ユニットで二本鎖を不安定化するとガイド鎖のRISC取り込みが有利になることは既知で、活性向上は想定の範囲内。面白いのはシードのオフターゲット挙動が立体化学で反転する点だ。足りないのはGNAや2′-5′結合シード修飾との直接比較と、効果の主因が幾何ではなくアミノ基の電荷かを切り分ける検証。次に試す価値があるのは、3′末端アミンをGalNAc結合点としてin vivoで使うことだ。