氨基无碱基构建单元可调节siRNA的活性、脱靶效应与稳定性
- 合成了四种基于吡咯烷和氨基环戊烷骨架的无碱基亚磷酰胺单体，并引入siRNA链的不同位置。
- 引入有义链后双链稳定性下降、沉默活性提高；其中一种氨基环戊烷异构体活性最强，而位于种子区的立体异构体可减轻类miRNA脱靶效应。
- 在小鼠中，高活性变体提高了肝脏基因敲低效果，种子区修饰体减少了脱靶转录本；3′末端引入则增强核酸酶抗性，并可作为偶联连接子。
💡 要点 基于摘要的观点
用无碱基单元削弱双链稳定性以促进引导链装载，是已知手段，活性提升并不意外；有意思的是种子区脱靶行为随立体化学而翻转。缺的是与GNA或2′-5′连接种子修饰的直接对比，以及区分起作用的是氨基电荷还是几何构型的实验。值得接着尝试的是把3′端胺基作为GalNAc连接位点做体内验证。