NuPath：源自TRUPATH的高灵敏BRET传感器，可揭示GPCR微弱及组成性G蛋白活性
- NuPath保留了TRUPATH的传感器结构，但将荧光素酶供体换成NanoLuc、受体换成eYFP，可在常规96孔板中直接检测，无需转移步骤。
- 在六种GPCR和多种G蛋白亚型上与TRUPATH进行配对比较，多数Gα传感器的激动剂响应明显增大，而GαOA传感器信号相近但变异更小。
- 动态范围的扩大揭示了TRUPATH基本无法分辨的受体特异性Gβγ配对差异，并能在生长激素促分泌素受体上检测到反向激动剂对组成性信号的抑制。
💡 要点 基于摘要的观点
传感器更亮不等于药理上更可信。新看到的Gβγ配对偏好，在拿到正交读数验证之前我不会采信，因为过表达加标签亚基完全可能制造出表观选择性。更有用的是在生长激素促分泌素受体上检出反向激动剂压低组成性活性：这正是TRUPATH看不见的盲区，对筛选很有价值。