适配体连接的JQ1偶联物:在无细胞体系中比较BRD4的E2/E3泛素化
- 通过点击化学将JQ1连接到可结合His标签的DNA适配体上,无需为每种E3单独开发配体,即可将带His标签的E3招募至BRD4。
- 在重组体系中,偶联物配合VHL复合物促进BRD4形成高分子量泛素化产物,最高浓度时反而减弱,与钩状效应相符。
- 不同E3与E2组合产生各异的泛素化图谱;借助无赖氨酸泛素和不同长度的偶联物,可区分链延伸与多位点修饰。
💡 要点 基于摘要的观点
作为工具化合物,它很有吸引力:用His标签接口取代E3配体,使E3之间的比较无需配体、更为干净。但带有庞大DNA连接体的无细胞读数,很难说明真实降解剂的情况,因为三元复合物的几何构型、通透性和连接体长度才决定降解效果。下一步应在同一体系中与匹配的JQ1-VHL型PROTAC(如MZ1)对比,看泛素化图谱是否与细胞内DC50相符。