クリックケミストリーのマイクロプレート合成でCDK2阻害剤のヒット・ツー・リードを加速
- 構造に基づく設計により、約1800種のトリアゾール誘導体ライブラリーを、精製なしで96ウェルプレート上の銅触媒クリック反応により構築した。
- 粗生成物をそのまま競合的蛍光偏光アッセイにかけ、2回のスクリーニングで活性化合物を絞り込んだ。
- 得られたLL-K2in10は結合アッセイと酵素アッセイの両方でCDK2を阻害し、複合体構造から複数の水素結合がSARの根拠として示された。
- OVCAR3細胞では標的結合を示唆する結果に加え、Rbリン酸化の低下、生存率の減少、細胞周期の変化が認められた。
💡 ポイント アブストラクトに基づく見解
粗生成物をそのままスクリーニングする手法は速い反面、残存銅や未反応のアジド・アルキン、凝集体が結合を偽装したり隠したりしうる。まずは上位ヒットを再合成・精製して活性が再現するか確かめたい。次に選択性で、ATP部位結合型の骨格はCDK1やCDK9との分離で躓くことが多い。キナーゼパネルでの評価と、既存のアミノピラゾール系やプリン系骨格との直接比較が欲しい。